瓊脂糖凝膠電泳涉及的步驟
閱讀：60發(fā)布時間：2024-10-6
那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡單介紹一下關(guān)于瓊脂糖凝膠電泳涉及的步驟：
一. 為了制備凝膠，將瓊脂糖粉與電泳緩沖液混合至所需濃度，并在微波爐中加熱使其熔化。
瓊脂糖凝膠濃度
1. 所用瓊脂糖的百分比取決于要分離的片段的大小。
2. 瓊脂糖的濃度是指瓊脂糖相對于緩沖液體積的百分比（w / v），瓊脂糖凝膠通常在0.2％至3％的范圍內(nèi)。
3. 瓊脂糖濃度越低，DNA片段遷移越快。
4. 通常，如果目的是分離大的DNA片段，則應使用低濃度的瓊脂糖，如果目的是分離小的DNA片段，則建議使用高濃度的瓊脂糖。
二. 將溴化乙錠添加到凝膠中（**終濃度為0.5 ug / ml），以促進電泳后DNA的可視化。
三. 將溶液冷卻至約60°C后，將其倒入裝有樣品梳子的澆鑄盤中，使其在室溫下固化。
四. 凝膠固化后，將梳子移開，注意不要撕裂孔的底部。
五. 仍在塑料托盤中的凝膠水平插入電泳儀并用緩沖液覆蓋。
六. 然后將含有DNA與上樣緩沖液混合的樣品吸移到樣品孔中，將蓋子和電源線放在設備上，并施加電流。
七. 可以通過觀察電極上的氣泡確認電流。
八. 鑒于其負電荷，DNA將遷移至通常為紅色的正電極。
九. DNA遷移到凝膠中的距離可以通過肉眼監(jiān)測跟蹤染料（如溴酚藍和二甲苯氰染料）的遷移來判斷。
以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于瓊脂糖凝膠電泳涉及的步驟。
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