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潔凈車(chē)間沉降菌檢測(cè)方法

閱讀：9037      發(fā)布時(shí)間：2012-8-24
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1．目的
規(guī)范質(zhì)量檢驗(yàn)人員對(duì)沉降菌檢驗(yàn)的操作，特制定本規(guī)程。
2．范圍
適用于沉降菌檢驗(yàn)的操作
3．責(zé)任人
質(zhì)量檢驗(yàn)人員
4. 內(nèi)容
4.1質(zhì)量檢驗(yàn)人員按規(guī)定對(duì)車(chē)間潔凈區(qū)沉降菌定期進(jìn)行檢驗(yàn)，按下表1確定好采樣點(diǎn)數(shù)，每個(gè)采樣點(diǎn)需做2個(gè)培養(yǎng)皿。
     表1    采樣點(diǎn)數(shù)

面積

（m²）

              潔凈度

300.000級(jí)

100級(jí)

10 000級(jí)

100.000級(jí)

＜10

2

2-3

2

2

≥10 ~ ＜20

2

4

2

2

≥20~ ＜40

2

8

2

2

≥40~ ＜100

2

16

4

2

≥100~＜200

3

80

10

3

≥200~＜400

6

160

20

6

≥400~＜1000

13

400

40

13

注：表中面積的含義是：對(duì)于單向流（層流）潔凈室，是指送風(fēng)面面積，對(duì)于亂流潔凈室是指房間面積。
4.2 每點(diǎn)培養(yǎng)皿數(shù)見(jiàn)下表（2）

    級(jí)別

    所需90mm培養(yǎng)皿數(shù)（以沉降0.5h計(jì)）

100 000級(jí)

            2

300 000級(jí)

            2

100級(jí)

           14

10 000級(jí)

            2

4.3 工作區(qū)采樣點(diǎn)位置離地0.8m～1.5m，也可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工序點(diǎn)增加采樣點(diǎn)。
4.4沉降菌測(cè)試規(guī)程
4.4.1測(cè)試人員：測(cè)試人員必須穿戴符合該環(huán)境級(jí)別的工作服，靜態(tài)測(cè)試時(shí)，室內(nèi)人員不得多于3 人。
4.4.2測(cè)試方法
4.4.2.1 所用的主要儀器和設(shè)備
高壓消毒鍋、恒溫培養(yǎng)箱、培養(yǎng)皿（一般采用f90mm×15mm的硼酸玻璃培養(yǎng)皿）
4.4.2.2 培養(yǎng)基
   普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基,制備及滅菌見(jiàn)培養(yǎng)基配制操作規(guī)程。
4.4.3采樣方法
    將已制備好的培養(yǎng)皿按規(guī)定的采樣點(diǎn)的要求放置,打開(kāi)培養(yǎng)皿蓋,使培養(yǎng)基表面暴露0.5小時(shí),再將培養(yǎng)皿蓋蓋上后倒置。
4.4.4培養(yǎng)
4.4.4.1全部采樣結(jié)束后,將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4.4.4.2 在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),時(shí)間不少于48h。
4.4.4.3 每批培養(yǎng)基應(yīng)有對(duì)照試驗(yàn)，檢驗(yàn)培養(yǎng)基本身量否污染?？擅颗x定3只培
養(yǎng)皿作對(duì)照培養(yǎng)。
4.4.5菌落計(jì)數(shù)
4.4.5.1用肉眼直接計(jì)數(shù),標(biāo)記或在菌落計(jì)數(shù)器上點(diǎn)計(jì),然后用5～10放大鏡檢查,是否遺漏。
4.4.5.2 若培養(yǎng)皿上有2個(gè)或2個(gè)以上的菌落重疊,可分辨時(shí)仍以2個(gè)或2個(gè)以上菌落計(jì)數(shù).
4.4.6結(jié)果計(jì)算
4.4.6.1 用計(jì)數(shù)方法得出各個(gè)培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。
4.4.6.2 平均菌落數(shù)的計(jì)算
    平均菌落數(shù)M=（M1+M2+M3+…….Mn）/n
M：平均菌落數(shù) M1：1號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù) M2：2號(hào)培養(yǎng)皿菌落敉
Mn：n號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù) n：培養(yǎng)皿總數(shù)
4.4.7結(jié)果評(píng)定：用平均菌落數(shù)判定。
4.4.7.1 潔凈室（區(qū)）內(nèi)的平均菌落數(shù)必須低于所選定的評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)。
4.4.7.2 若某潔凈室（區(qū)）內(nèi)的平均菌落數(shù)超過(guò)評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)，則必須對(duì)此區(qū)域行消毒，然后重新采樣兩次，測(cè)試結(jié)果均須合格。
附：    潔凈室（區(qū)）空氣潔凈度級(jí)別表

潔凈度級(jí)別

塵粒大允許數(shù)/立方米

微生物大允許數(shù)

≥0.5μm

≥5μm

浮游菌/立方米

沉降菌/皿

100級(jí)

3,500

0

5

1

10.000級(jí)

350,000

2,000

100

3

100.000級(jí)

3,500,000

20,000

500

10

300.000級(jí)

10,500,000

60,000

--

15

5.提供檢測(cè)用臭氧消毒機(jī)廠(chǎng)家：廣州市環(huán)偉環(huán)?？萍加邢薰?。
6.檢測(cè)結(jié)果：小于10個(gè)則達(dá)到了要求的十萬(wàn)級(jí)無(wú)菌要求。

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潔凈車(chē)間沉降菌檢測(cè)方法

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提示

面積（m²）	潔凈度
面積（m²）	300.000級(jí)	100級(jí)	10 000級(jí)	100.000級(jí)
＜10	2	2-3	2	2
≥10 ~ ＜20	2	4	2	2
≥20~ ＜40	2	8	2	2
≥40~ ＜100	2	16	4	2
≥100~＜200	3	80	10	3
≥200~＜400	6	160	20	6
≥400~＜1000	13	400	40	13

級(jí)別	所需90mm培養(yǎng)皿數(shù)（以沉降0.5h計(jì)）
100 000級(jí)	2
300 000級(jí)	2
100級(jí)	14
10 000級(jí)	2

潔凈度級(jí)別	塵粒大允許數(shù)/立方米		微生物大允許數(shù)
潔凈度級(jí)別	≥0.5μm	≥5μm	浮游菌/立方米	沉降菌/皿
100級(jí)	3,500	0	5	1
10.000級(jí)	350,000	2,000	100	3
100.000級(jí)	3,500,000	20,000	500	10
300.000級(jí)	10,500,000	60,000	--	15